高效液相色仪(HPLC)谱菜鸟扫盲篇

2021-02-23 08:31:20来源:admin
高效液相色谱(HPLC)是集成化很高的仪器。它包括了泵输送流动相,六通阀的进样,色谱柱的分离,检测器的检测和记录积分设备的记录和数据计算构成的。
 
高效液相色谱(HPLC)的工作原理
 
气相色谱仪用氮气或者氦气做载气,把载气换成流动相(Mobile phase),流动相也称为载液。高效液相色仪(HPLC)是通过管路连接这各个部件按,流动相在泵的驱动下,流经色谱的全系统到达废液,样品经过了流通阀,进入色谱系统,在流动相的带领下,进入色谱柱进行分离。被分离的样品中各个成分,进入检测器,被检测。由记录仪记录检测信号,流经废液。或者被收集。这就是高效液相色谱(HPLC)的整个系统工作描述。
 
高效液相色谱(HPLC)的各系统
 
HPLC是有五大系统构成:动力系统,进样系统,分离系统,检测系统,数据分析和记录系统构成。
其中:
动力系统:泵
进样系统:六通阀和进样针,或者自动进样器
分离系统:色谱柱
检测系统:检测器,一般有紫外检测器,荧光检测器,示差折光检测器,MS检测器等等。
记录系统:电脑工作站等
连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。
 
高效液相色谱(HPLC)的动力系统:泵
 
泵是HPLC的动力系统。气相色谱的动力,实际上是钢瓶中气体的压力。而液体,它只有通过泵的转动而使之流动。
我们做一个类比:血液类比成流动相,心脏类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么,血液在心脏作为动力系统,流经着身体的各个系统。如果心脏跳得快点,那么血流量加大,那么血压升高。同样,泵流速提高,流动相流量增大,那么色谱系统压力增高;如果血管被压迫半堵了,那么同样的心跳速度,压力也会增高。同样道理,如果色谱系统被污染,那么污染物堵在色谱柱头,或者各连接口等,那么泵同样的流速,就有可能压力变大。高效
 
HPLC记录系统主要记录色谱图,并且对色谱图进行面积计算(积分)。同时可以用软件计算出其他,比如峰宽,塔板数,拖尾因子等。同时也可以通过输入称样量和稀释倍数,计算出测试样品中各组分的含量。

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