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液相色谱仪流动相使用的注意事项

作者:山东气相色谱仪 来源:www.sdpxyq.com 发布日期:2021-08-30
液相色谱仪使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并要先经0.45μm薄膜过滤。过滤后的流动相经过充分脱气,以除去其中溶解的气体(如O2),如不脱气易产生气泡,增加基线噪声,造成灵敏度下降,甚至无法分析。
 
液相色谱仪几中脱气方法比较:
 
1. 氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。
 
2. 加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染。
 
3. 抽真空脱气法:易抽走有机相
 
4. 超声脱气法:一种较为常见的脱气法。流动相放在超声波容器中,用超声波震荡10~15分钟,此法效果并不是太好,但操作简单。
 
如果管路中使用peek树脂部件,请不要使用下列流动相:
 
浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜
 
特别注意
 
含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法:
 
1. 先用10︰90的甲醇/水冲洗,以洗去缓冲盐,清洗时间至少为一小时。
 
2. 再用70︰30的甲醇/水冲洗系统,清洗时间至少为40分钟。
 
3. 将系统保存在纯甲醇中。
 
液相色谱仪流动相的更换
 
在分析过程中,有时需要更换流动相进行分析。一定要注意前一种使用的流动相和所更换的流动相是不是能够相溶。如果前一种使用的流动相和所更换的流动相不能够相溶,那您就要特别注意了。要采用一种与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相进行过渡、清洗。较为常用的过渡流动相为异丙醇,但实际操作中要看具体情况而定,原则就是采用与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相。一般清洗的时间为30~40分钟,直至系统完全稳定。
 
如不进行以上“特别注意”上述步骤的操作,将会导致系统管路堵塞。严重时将引起流通池污染堵塞,不得不更换流通池。用户就要承担不必要的损失了。
 
液相色谱仪储液器的注意事项
 
保持流动相储液器的清洁是保证液相色谱仪正常使用的关键。要使用HPLC级的溶剂,对试剂含有缓冲盐及非HPLC级的流动相一定要用0.45μm过滤器除去其中的微粒物质。

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